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TECNICA DE BILIRRUBINA

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TECNICA DE BILIRRUBINA EN SUERO


FUNDAMENTO

La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado produciendo un pigmento color rojo-violáceo (azobilirrubina)
que se mide fotocolorimétricamente a 530 nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta)
requiere la presencia de un desarrollador acuoso que posibilite su reacción. De forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción.

 MUESTRA

Suero, plasma o líquido amniótico
a) Recolección: obtener suero o plasma de la manera usual.
Proteger de la luz natural o artificial, envolviendo el tubo con papel negro.
También es posible realizar la determinación en líquido amniótico.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma, debe usarse heparina para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis moderada o intensa inhibe la reacción directa, obteniéndose valores
de bilirrubina total falsamente aumentados.

d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no efectuarse
el ensayo en el momento, el suero debe conservarse hasta 48 horas en el refrigerador (2-10oC) y la sangre entera
no más de 24 horas en refrigerador o 12 horas a temperatura ambiente. El líquido amniótico es conveniente mantenerlo congelado
hasta el momento de efectuar el ensayo.
La acción de la luz es capaz de destruir en una hora hasta un 50% de la bilirrubina presente en la muestra. Es por tal motivo que debe protegerse cuidadosamente.

 

VALORES DE REFERENCIA

Bilirrubina en suero o plasma
– Adultos:
Directa: hasta 2 mg/l
Total: hasta 10 mg/l

 

CALCULO DE LOS RESULTADOS

  • Bilirrubina total (mg/l) = (T – B) x f
  • Bilirrubina directa (mg/l) = (D – B) x f
  • Bilirrubina libre (indirecta) = BRB total – BRB directa

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