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MICROBIOLOGIA: UROCULTIVO





AREA MICROBIOLOGIA



UROCULTIVO



EL
urocultivo  se utiliza para diagnosticar bacteriuria, la orina constituye
un método excelente para cultivar la mayor parte de microorganismos que
infectan el aparato urinario.

La
combinación de piuria con bacteriuria considerable sugiere la presencia de una infección
urinaria.

UTILIDAD
CLINICA:

  1. Cuando los síntomas indican una posible
    infección urinaria como: dolor y sensación de calor al orinar, así como
    urgencia frecuente de orinar.
     
  2. Cuando un paciente esta canalizado por
    largo tiempo, aunque no muestre síntomas de infección.

  3. En mujeres embarazadas para monitorear
    cualquier bacteria en la orina que pueda causar algún problema al bebé.

    RECOLECCION DE LA MUESTRA PARA CULTIVO: PRINCIPIO GENERALES:

< Urocultivo http://d1.scribdassets.com/ScribdViewer.swf?document_id=8555111&access_key=key-84htl457ruszd8pi4o3&page=1&viewMode=list La muestra ideal es la primera de la mañana
debido a que la cuenta bacteriana es mayor.

·        
Se requiere de 3 a 5 ml de orina reciente en
un recipiente estéril, también se puede obtener mediante una sonda uretral,
suprapubica o permanencia.

·        
las muestras para urocultivos no se toman de
bolsas recolectoras de orina que forman parte del sistema de drenaje a través
de una sonda.

  • Se lleva al orina al
    laboratorio y se examina lo mas pronto posible, de no ser asi, la orina se
    puede refrigerar hasta 2hrs antes de someterla a cultivo.
  • En caso que el diagnostico
    sea de citomeglavirus, deberán mantenerse a temperatura ambiental, ya que la
    refrigeración destruye a los virus.
  • Para estlabecer
    bacteriuriua, se toman 2 muestras sucesivas del chorro medio.
  • Las muestras se deben de obtener
    antes de un tratamiento con antibióticos.
  • el personal de salud
    instruye al paciente respecto de la técnica adecuada para recolectar la
    muestra.
  • La muestra de orina se
    cubre y el recipiente se rotula y se incluye lo siguiente información:
  • Ficha de identificación,
    Nombre del medico, Diagnostico probable, Método de recolección, Hora en
    que se obtuvo la muestra, Administración de líquidos forzados o
    intravenosos, Administración de sustancias quimioterapeuticas especificas.



TECNICAS PARA OBTENER
UNA MUESTRA LIMPIA DE ORINA O DEL CHORRO MEDIO

  

Toma de Muestras en Mujeres:
        

La muestra debe ser tomada preferentemente en el Laboratorio. Si ello no
es posible, seguir las mismas instrucciones en su casa.

       

Debe hacerse una antisepsia previa de
la zona genital, por lo tanto debe tener a la mano lo siguiente:

a) jabón desinfectante

b)
agua hervida o agua estéril

c)
gasa

estéril o un paño acabado de lavar

d)
el recipiente para tomar la muestra.


Proceda primero a lavarse las manos y luego siéntese en el inodoro, lo más
hacia atrás que pueda. Separe
 los labios genitales con una mano y mantenga
los pliegues
 separados y proceda a asearse toda la zona
genital con el jabón desinfectante. Enjuague con abundante agua estéril y luego
seque bien con gasa estéril o con un paño limpio.

 

Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco SÓLO EN EL
MOMENTO DE LA MICCIÓN
y sin
 tocar con los dedos su interior, coloque la tapa con el lado plano hacia
abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. Empiece a orinar la
poceta y recoja en el frasco,
sólo
la muestra del chorro del medio es decir, no debe recoger ni la primera, ni la
última parte del chorro de orina.


Tape muy bien el
frasco y rotúlelo con su nombre.

Tráigalo al Laboratorio lo más pronto
posible, en un recipiente con hielo, cuidando de que no se bote el contenido.


Toma de Muestra en hombres:
         
 La muestra debe ser tomada preferentemente en
el Laboratorio. Si ello no es posible, seguir las mismas instrucciones en su
casa.
 Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe
tener a la mano lo siguiente:

 a) jabón desinfectante

 b) agua hervida o agua estéril a
temperatura ambiente

 c) gasa estéril o un paño acabado de
lavar

d) el
recipiente para tomar la muestra.


         
Lavarse con jabón desinfectante
primero las manos y luego la cabeza del pene empezando por la abertura uretral
y continúe en dirección a usted, como muestra la ilustración,previa retracción
del prepucio, si no está circuncidado.

 

Luego enjuagar bien con agua estéril o previamente hervida (a temperatura
ambiente) y secar con gasa estéril.
         
 Destape el frasco recolector sólo en el momento de la micción y sin
tocar con los dedos su parte interna, coloque la tapa con el lado plano hacia
abajo. Comience a orinar en la poceta y recoja en el frasco sólo la muestra del
chorro del medio, es decir, no debe recoger ni la primera ni la última parte del
chorro de orina.

Tapar bien el frasco, rotularlo con su nombre
y traerlo al laboratorio lo más pronto posible, en un recipiente con hielo y
cuidando de que no se bote.

El examen microbiológico
de una muestra de orina se denomina Urocultivo. Éste se ha de hacer desde un
punto cuantitativo y cualitativo.

PROCESAMIENTO DEL UROCULTIVO


 

A. Examen cuantitativo

  Método de conteo
en placa o recuento de colonias
.
Introducido por Kaas para
evitar los riesgos del cateterismo vesical y diferenciar bacteriuria verdadera
de contaminación, se realiza de la siguiente manera:

·        
Se homogeneiza la muestra mediante agitación.

·        
Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1 ml.
de orina en 9.9 ml. de caldo de tripticasa o de suero fisiológico, estériles.

·        
Se preparan diluciones al 1:1000 y 1:10 000, a partir de la dilución
al 1:100.

·        
Se deposita 1 ml. de cada dilución en placas de
Petri esterilizadas, sobre las cuales se vacía un tubo de agar-tripticasa o
medio CLED, fundidos y enfriados a 45°. Mediante rotación suave, se favorece la
distribución homogénea de la siembra.

Método de Kass

·        
Se incuban todas las siembras a 37° durante 24 a 48 horas.

Para calcular el número de
colonias se eligen placas que contengan entre 30 y 300 colonias. Contadas
éstas, basta multiplicar su número por la dilución respectiva para obtener la
cuenta total.

  Método del asa calibrada. Esta estimación cuantitativa
consiste en sembrar una placa con medio de agar-sangre o agar con CLED en una
muestra de orina, sin centrifugar, empleando asa de platino calibrada (4 mm. de diámetro). Después de
incubar las siembras a 37° durante 24
a 48 horas, se cuenta el número de colonias
desarrolladas y el resultado se multiplica por 100, ya que la asada de platino
contiene 0.01 ml. de orina.

Los resultados del estudio
cuantitativo se informan de la siguiente manera:

·        
No hubo desarrollo microbiano.

·        
Menos de 10 000 colonias por ml.

·        
Entre 10 000 y 100 000 colonias por ml.

·        
Más de 100 000 colonias por ml.

Cuando se obtienen dos recuentos
sucesivos con más de 100 000 colonias por ml., la probabilidad de infección es
de 80%, cifra que se eleva a 95% si el mismo resultado se logra en tres
recuentos sucesivos.

Por lo general, las muestras
contaminadas tienden a mostrar cuentas inferiores a 10 000 colonias/ml. Cuando
el recuento revela valores intermedios, entre 10 0000 y 100 000 colonias /ml,
el examen debe repetirse. Conviene advertir que pueden pasar inadvertidas
infecciones urinarias verdaderas, si no se toman en cuenta cuentas inferiores a
100 000 colonias por ml, ya que existen diversos factores que pueden explicar
recuentos bajos en infecciones urinarias verdaderas, diuresis acentuada,
obstrucción uretral, infecciones crónicas e infecciones por cocos
grampositivos.

b. Examen cualitativo

El estudio cualitativo, que
conduce a la identificación del agente, se realiza mediante la siembra de la
muestra homogeneizada, en placas con agar-sangre, agar-CLED, agar de Levine o
MacConkey. Es recomendable el medio CLED, porque favorece el desarrollo de
bacterias patógenas urinarias y permite la identificación de los
microorganismos contaminados. Su contenido en cisteína y lactosa y su
deficiencia en electrolitos facilitan, por una parte, el reconocimiento de
colonias de bacterias y, por otra, inhiben el carácter invasor de las colonias
de Proteus. Así se facilita la identificación de estafilococos, bacilos
difteromorfos, lactobacilos y otros agentes que pueden contaminar la orina.

La identificación final de los
agentes se hace mediante el estudio de sus propiedades bioquímicas y
características serológicas. Esto permite establecer relaciones de identidad
entre microorganismos aislados en cultivos sucesivos o de control, y definir el
estado de revivida o de reinfección. De esto deriva el valor que tiene el
conocimiento del biotipo, del serotipo (particularmente en E. coli), del
piocinotipo (en especial cuando es de Ps. aeruginosa) y del antibiótico.
Éste último se obtiene al comparar el antibiograma de cepas aisladas de
muestras obtenidas de diferentes oportunidades en un mismo paciente Si existe
correspondencia, se concluye que se trata de una misma cepa.

 

* Métodos
rápidos de diagnóstico
.

  • Existen varios procedimientos prácticos y económicos
    para el diagnóstico rápido de infecciones urinarias o de bacteriurias
    significativas. Son útiles para investigar grandes grupos de personas.
    Estos métodos pueden ser microscópicos, químicos o de microcultivo.
  • La coloración de un frotis de orina no centrifugada
    mediante el método de Gram constituye un índice práctico para diferenciar
    entre infección y contaminación urinarias. En efecto, la observación de un
    bacilo gramnegativo por campo microscópico puede realizarse cuando la
    muestra contiene más de 100 000 bacterias por ml. Sin embargo, la
    dificultad de encontrar bacterias en frotis de orina por este método,
    provoca resultados falsos negativos. Menos confiable aun es el hallazgo de
    20 o más bacterias gramnegativas por campo microscópico de sedimento
    urinario, aunque dicho número permita sospechar recuentos superiores a 100
    000 microorganismos por ml.
  • Los procedimientos químicos están basados en propiedades
    enzimáticas de las bacterias, que se pueden poner de manifiesto en la
    orina. Entre las pruebas se pueden mencionar: catalasa, reducción de
    nitratos, reducción de trifeniltetrazolio e hipoglucosuria. Estos métodos,
    aunque rápidos y económicos, tienen el inconveniente de ser indirectos,
    basarse en propiedades metabólicas de las bacterias y no en su desarrollo
    y observación, y producir muchos falsos negativos.


Placas de agar McConkey y de agar CLED, donde ha crecido un Escherichia
Coli en cultivo puro, con un recuento superior a 100.000 UFC/ml.
(cultivo sembrado con asa calibrada de 1/1000).

SIGNIFICADO CLINICO:

Los siguientes microorganisamos en titulación
suficiente se consideran patógenos:

  • Escherichia coli,
    Enterococcos, Neisseria gonorrhoeae, Klebsiella, Enterobacter, algunas
    especie de Serratia, Mycobacterium tuberculosis, Especies de Proteus,
    Pseudomona aeruginosa, Estreptococco hemolitico genralmente del gurpo B,
    Candida albicans y otras levaduras.

 

INTERFERENCIAS:

  • Pacientes que esten
    recibiendo liquidos forzados, la orina esta tan diluida que la cuenta de
    los colonias disminuye por debajo de los 105/mililitro.
  • La contaminacion bacteriana
    puede provenir de:
  • vello perianal, bacterias
    localizadas debajo del prepucio,bacterias de las secreciones vaginales,
    dela vulva o de laporcion distal de la uretra, bacterias provenbientyes de
    las manos , pies o ropa.

 

FUENTES:

  1. http://www.paraqueestesbien.com/analisis/analisis_70.html
  2. http://www.lebbyac.com/manual/instrucciones/urocultivo.html
  3. http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/urocultivo.html
  4. Fisbach, Manual de
    pruebas diagnosticas, Editorial McGraw hill
  5. http://html.rincondelvago.com/urocultivo.html
  6. www.zambon.es/…/03mujer/atlas/fichas/7177.htm


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