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HEMOCULTIVO

HEMOCULTIVO

Muestra: Sangre entera

Indicaciones para la toma de la muestra:

Desinfectar la piel a punzar con alcohol de 70 %
Dejar secar
Pasar solución de yodo al 2 % con un algodón o gasa dejando actuar no menos de 1 minuto.
Descontaminar el tapón de la botella con alcohol solamente, pudiendo cambiarse o no la aguja antes de inocular la sangre.
En adultos recolectar no menos de 10 ml de sangre, en niños de 1-5 ml.
En adultos es conveniente tomar 3 muestras con un intervalo de 20-30 minutos.

Las
muestras deben obtenerse antes del inicio de la medicación antibiótica.
Si el paciente recibe antibióticos extraer la sangre en el momento de
menor concentración del antimicrobiano.

***************

HEMOCULTIVO
CALDO



Es un medio especialmente formulado para el desarrollo de microorganismos
aeróbicos y anaeróbicos, ya que contiene atmósfera
de CO2. Este medio contiene en su formulación Polianetol sulfonato
de sodio (PSS) que impide la coagulación de la sangre e inhibe
la capacidad fagocitaria de los leucocitos.

Además
contiene los ingredientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos
hallados comunmente en las bacteremias. Este medio se presenta en volúmenes
de 10, 25, 50 y 100 ml, lo que permite seleccionar el volumen adecuado
a usar, de acuerdo a la cantidad de sangre a inocular.

PROCEDIMIENTO:

Toma
de Muestra

Se
deberá tomar la muestra antes de comenzar con la antibioticoterapia
o en su defecto, cuando el nivel de antibiótico en sangre sea mínimo,
es decir antes de una nueva administración. Si el paciente presentara
picos de fiebre, la extracción de la sangre se deberá realizar
en este momento. La cantidad de muestras a tomar la decidirá el
médico de acuerdo al cuadro clínico presentado.

Se
deberá desinfectar la piel con tintura de yodo o alcohol etílico
al 70%, dejando actuar el desinfectante por lo menos 1 minuto. Esto es
también aplicable al tapón de goma del frasco de Hemocultivo
a utilizar.


    • Desinfecte el tapón de caucho del frasco de hemocultivos
      con alcohol
      etílico al 70%. No utilice solución de yodo para limpiar el
      caucho.
    • Asépticamente desinfecte el sitio de la venopunción
      con alcohol etílico al 70% y luego con una preparación de yodo en círculos
      concéntricos hacia fuera del sitio elegido. Espere que el yodo seque
      y realice la punción sin palpar de nuevo.
    • Coleccione la muestra de sangre
      a razón de 0.5 – 2 ml para niños y 5-10 ml para adultos en
      cada frasco. El volumen de sangre
      a cultivar es el factor más importante en la recuperación
      del microorganismo.
    • Cada frasco debe ser servido con una punción diferente
      en diferentes tiempos, a menos que utilice a la vez frascos para organismos
      aeróbicos y anaeróbicos. Nunca llenar todos los frascos con sangre
      provenientes de una sola punción.
    • No tomar sangre del catéter, a menos que se esté realizando un estudio epidemiológico.

La
cantidad de sangre a extraer estará dada de acuerdo al frasco a
utilizar según:

Hemocultivo
Pediátrico 1 a 2 ml de sangre
Hemocultivo Adulto 5 ml de sangre
Hemocultivo Neonatal 0,5 a 1 ml de sangre
Hemocultivo 100 10 ml de sangre

Inoculación
de los frascos

Una
vez realizada la extracción de la sangre y la desinfección
del tapón de goma, se inocula la sangre, sin introducir aire, y
se hace rotar el frasco, por inversión.

Incubación
de los frascos

Los
mismos deberán incubarse a 35-37ºC por lo menos durante una
semana. En algunos casos de deberán incubar hasta 14 días
(Haemophilus, Neisserias, levaduras).

Observación
de los frascos

Los
frascos se deberán observar cada 24 a 48 hs. Durante el tiempo
que dure la incubación. Observar cualquier cambio de color, aumento
de turbidez, presencia de burbujas, etc.

Subcultivos

Se
deberán realizar subcultivos cada 24hs. Para ello se desinfectara
el tapón de goma del frasco y se retirara, 0,25 a 0,5 ml de medio,
con aguja y jeringa esteriles. Con el material extraído se realizarán
cultivos en agar sangre y/o chocolate, además de una coloración
de gram o naranja de acridina. Las placas sembradas se deberán
incubar también con presencia de CO2 (Vela) y en estricta anaerobiosis
(jarras).

Interpretación
de los resultados

Ha
de tenerse sumo cuidado en evaluar los resultados obtenidos, ya que existe
la posibilidad de contaminación tanto en el cultivo como en los
subcultivos y coloraciones.
Siempre es necesario obtener el mismo germen en dos o más muestras
para considerarlo Positivo, salvo en algunos casos donde el microorganismo
recuperado (en una sola muestra) no se trate de un organismo presente
en la flora habitual de piel, entonces podrá considerarse como
posible agentes causales.

La
presencia de gérmenes en la coloración no siempre debe considerarse
como provenientes del cultivo ya que existen posibilidades de contaminación
con organismos ambientales.
Si en la coloración de una o más muestras, se observa la
presencia de organismos y en los cultivos sin CO2 o con "vela"
no hay desarrollo, habrá que prestarle mucha atención al
cultivo con anaerobiosis total (Jarra).

Se
recomienda tomar 3 o más muestras, con diferencia de varios días,
durante los picos de fiebre. Si en todas las muestras, los resultados
son negativos podrá considerarse que el cuadro clínico no
está relacionado con los agentes infecciosos detectable con esta
técnica.

Método: Cultivo:

Frascos convencionales
Bifásicos
Lisis-centrifugación
Automatizados


Significado clínico:

Microorganismos Patologías
S. aureus Infecciones por catéteres, endocarditis, infecciones osteoarticulares, partes blandas
Estafilococos coagulasa-negativa Infecciones
por catéteres, válvulas cardíacas protésicas, shunts, infecciones de
prótesis osteoarticulares, septicemia en neonatos e inmunosuprimidos
Streptococcus beta hemolítico grupo A Piel y partes blandas, neumonía, infecciones osteoarticulares y genitourinarias
E. beta hemolítico grupo B Genitourinarios, meningitis y sepsis neonatal
E. beta hemolítico grupo C y G Endocarditis aguda, neoplasias, celulitis, alcoholismo, cirrosis
Enterococcus spp Endocarditis, infecciones genitourinarias y del tracto biliar, heridas quirúrgicas
Estreptococos grupo viridans Endocarditis, abscesos profundos
S. pneumoniae Meningitis, neumonías, peritonitis bacteriana espontánea
Corynebacterium JK Infección asociada a catéteres vasculares en neutropénicos
Erysipelothrix spp Endocarditis, infección de herida, celulitis
Lactobacillus spp Endocarditis, abscesos profundos
C. septicum, E. bovis Carcinoma de colon
H. influenzae tipo B Meningitis, epiglotitis, neumonías, celulitis, osteoartritis
Grupo HACEK, H. parainfluenzae Endocarditis
Campylobacter spp Endocarditis, celulitis en pacientes inmunosuprimidos
Anaerobios Infección intraabdominal, infecciones genitourinaria y necrotizantes de partes blandas
Enterobacterias Infecciones del tracto biliar, genitourinarias, heridas quirúrgicas, meningitis y sepsis neonatal, neumonías intrahospitalarias
Salmonella spp Anemia drepanocítica
Salmonella spp, Shigella spp, Rhodococcus spp, C. neoformans, H. capsulatum, micobacterias Infección por VIH
P. stuartii Obstrución del tracto urinario o paraplejía en gerontes
Aeromonas spp, Plesiomonas spp,
Vibrio spp
Gsatroenteritis, celulitis, cirrosis, alcoholismo, neoplasias
Bacilos gram negativos no fermentadores Infección de catéteres, líquidos de infusión, infección urinaria, neumonías intrahospitalarias, heridas quirúrgicas
Malassezia furfur Infección asociada a catéter de alimentación parenteral

El hemocultivo se utiliza para el diagnóstico de endocarditis infecciosa (EI).
Las bacterias que más frecuentemente se aíslan son: St. aureus, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae, Estreptococos del grupo viridans.

La
EI se produce principalmente en los drogadictos endovenosos, en
pacientes con reemplazos valvulares, en la bacteriemia hospitalaria y
en los mayores de 60 años.

Los gérmenes mas frecuentemente aislados son:

Streptococcus spp 60-80 %
Estreptococos grupo viridans 30-40 %
Enterococcus spp 5-18 %
Otros estreptococos 15-25 %
Staphylococcus spp 20-35 %
Estafilococos coagulasa positivos 10-27 %
Estafilococos coagulasa negativos 1-3 %
Bacilos aerobios Gram negativos 1.5-13 %
Hongos 2-4 %
Otros gérmenes <5 %
Infecciones mixtas 1-2 %
Cultivo negativo 2.5-31 %

Streptococcus spp causa el mayor porcentaje de EI, especialmente las EI nosocomiales

Enterococcus spp se
aísla en drogadictos endovenosos, en hombres mayores de 60 años que
tuvieron alguna instrumentación genitourinaria, mujeres jóvenes que
fueron sometidas a procedimientos obstétricos.

Streptococcus pneumoniae
tiene a menudo una evolución fulminante y se asocia a formación de
abscesos perivalvular, pericarditis, existiendo predilección por la
válvula aórtica. Es frecuente en pacientes alcohólicos, puede
presentarse también meningitis.

Abiotrophia spp (Estreptococos con variante nutricional) es la causa de EI en pacientes con cardiopatía previa e infectan la válvula nativa.

Streptococcus agalactiae
(Estreptococos del grupo B) es frecuente en pacientes con alguna
enfermedad de base como diabetes, carcinoma, alcoholismo, insuficiencia
hepática, uso de drogas endovenosas.

Gemella haemolysans es otro microorganismo que se puede aislar en EI.

Staphylococcus aureus y Pseudomonas aeruginosa se aíslan generalmente en adictos intravenosos.

Staphylococcus epidermidis es
causante de EI en válvulas protésicas. También se lo aísla en lactantes
con catéteres venosos umbilicales en las unidades de cuidados
intensivos.

Salmonella spp, Escherichia coli, Serratia marcescens se asocian a pacientes con válvula protésica, drogadictos endovenosos y a cirrosis.

Listeria spp, Lactobacillus spp y Corynebacterium spp también pueden encontrarse en EI.

Las
EI micóticas ocurren en drogadictos endovenosos, luego de una cirugía
cardiovascular y de tratamiento prolongado a antibióticos.

Candida parapsylosis y C. tropicalis predominan en adictos.

C. albicans y Aspergillus spp se hallan en las personas no adictas.

Otros hongos como Histoplasma spp, Blastomyces spp y Cryptococcus spp pueden producir EI.

Utilidad clínica: El hemocultivo sirve para:

  • · Confirma la sospecha clínica de la presencia de un foco infeccioso en algún lugar del organismo.
  • · El diagnóstico etiológico de la endocarditis infecciosa.
  • · Monitoreo de la terapia antimicrobiana.
  • · Evolución de la infección.

Limitaciones: Factores que hacen que se obtengan hemocultivos negativos en EI:

Tratamiento previo con antibióticos
Cultivos obtenidos al final de un proceso crónico (más de 3 meses)
Endocarditis causada por microorganismos de difícil desarrollo
Endocarditis micótica
Endocarditis causada por Chlamydia spp, virus, Rickettsia spp, Coxiella burnetti, Legionella pneumophila
Endocarditis no infecciosa
Endocarditis mural
Endocarditis derecha
Diagnóstico no correcto

FUENTE:
http://www.brizuela-lab.com.ar/producto.html
http://www.farestaie.com.ar

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